A Gain-of-function Polymorphism – תרגום
THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
© 1999 by The American Society for Biochemistry and Molecular Biology, Inc.
המגזין לביוכימיה
© כל הזכויות שמורות לאגודה האמריקאית לביוכימיה וביוכימיה מולקולרית בע"מ, 1999
Vol. 274, No. 18, Issue of April 30, pp. 12670–12674, 1999
Printed in U.S.A
כרך 274 , מס' 18 , גיליון 30 באפריל , עמ' 12674-12670 , 1999
הודפס בארה"ב
פונקציית הרווח בצורותיה השונות בתהליך צימוד קולטנים לחלבון G
טווח פעילות הקולטן האדרנרגי מסוג בטא1 ממקור אנושי*
(התקבל לפרסום , 3 בפברואר , 1999 ; ובגרסה המתוקנת: 18 בפברואר, 1999)
דבורה א. מייסון, דונלד ג'. מור, סטיוארט א. גרין וסטפן ב. ליגט ‡
החומר העיוני נאסף מהמחלקה לרפואה ופרמקולוגיה, הפקולטה לרפואה באוניברסיטת סינסינטי, סינסינטי, אוהיו 45267
(β1AR) – הקולטן האדרנרגי מסוג בטא1 (β1), הינו התא-מפתח המאותת ומשפעל את החלבון הנמצא בלב ובאיברי גוף אחרים, ומתווך בין פעולות הקטכולאמינים במערכת העצבים הסימפתטית. במחקרים זיהינו פעילות פוליפורמית ("רב-צורתית") המתרחשת בזנב הציטופלזמי הבין-תאי – קרוב למקטע השביעי הארוך והטרנסממברנלי של ה- β1AR האנושי – בעוקבה של אנשים נורמליים. כמו כן, זיהינו את קיומם של גליצין (Gly) או ארגנין(Arg) (טווח תדרים אללים של 0.26 ו- 0.74, בהתאם) המייצגים את החומצה האמינית מס' 389, כך שהראשון מייצג את הקולטן β1AR של זן הבר wild-type באדם. כדי ליצור חיקוי של שני הוריאנטים ("גרסאות") האלה תוך שימוש במוטגנזה מכוונת, החדרנו קבוצה של קולטנים Gly-389 ו- Arg-389, בתור גורמים גנטיים זרים, אל תאי CHW-1102. במחקרים פונקציונליים אשר כללו צירופים זהים של זנים, קולטני ה- Arg-389 הראו קצת יותר דרגות-בסיס בסולם ה- PH בפעילויות האדנילט ציקלאז (10.7 ± 1.2 לעומת 6.1 ± 0.4 פיקומול/דקה/מ"ג pmol/min/mg). עם זאת, הרמות המקסימליות המושפעות מגירויי איזופרוטרנול, היו גבוהות משמעותית מצד ה- Arg-389 בהשוואה לקולטן Gly-389 (63.3 ± 6.1 לעומת 20.9 ± 2.0 פיקומול/דקה/מ"ג). גם קשרי [35S]גואנוזין 5’-O–(טיו-טריפוספט), עלו עם גדילת מספר קולטני Arg-389 (המצומדים בחוזקה ובעקביות לחלבוני G) ועם הגברת פעילות האדנילט ציקלאז. מחקרים תחרותיים נערכו בתחום האגוניסטים, מבלי לכלול את גואנוזין 5’-(אמידו בטא, גמא) טריפוספט; והתברר שאי אפשר לפרק את הקשר הזיקתי
